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高效陰離子交換色譜積分脈沖安培檢測法

來源 : www.ztmjt.com   發布時間 : 2014-11-27
  高效陰離子交換色譜積分脈沖安培檢測法氨基酸分子中的羧基在強堿性介質中可形成陰離子,而氨基酸分子中的氨基在強堿性介質中和一定的電位下可在貴金屬(金、鉑)電極表面發生氧化反應,基于上述原理可實現對氨基酸的陰離子交換色譜分離和積分脈沖安培檢測。該方法的優點是不需要對氨基酸進行衍生化處理,可直接進行分離和檢測,且檢出限較低。蔡亞歧等将高效陰離子交換色譜-積分脈沖安培檢測法應用于魚粉和玉米粉水解液中氨基酸組分的分析測定,使用DionexAminoPacPA10陰離子交換柱為分析柱,控制柱溫為35℃,以NaOH和NaAc強堿性溶液為淋洗液,在合适的梯度條件下,實現了對17種常見氨基酸的高效分離與高靈敏檢測。
  氣相色譜法
  将氨基酸衍生化為易于汽化的物質後,采用氣相色譜法可測定多組分混合氨基酸。該方法的優點是分離時間短、柱效高及易與質譜聯用,缺點是衍生化反應容易産生幹擾成分。Husek等采用氣相色譜法同時分析血漿中的20種氨基酸和30種非氨基有機酸,樣品制備時間少于30min。
  高效液相色譜法
  該方法包括柱前衍生和柱後衍生兩大類。目前多用柱前衍生-反相高效液相色譜法,即首先将氨基酸轉化為适于反相液相色譜分離并能被靈敏檢測的衍生物,然後采用高效液相色譜法對上述衍生物進行分離和檢測。該方法靈敏、快速、應用範圍廣、易于自動化。牟德海等建立了鄰苯二甲醛(OPA)手動柱前衍生-反相高效液相色譜法測定樣品中氨基酸含量的方法,對牛血清白蛋白(BSA)的氨基酸組成和小鼠血清中的遊離氨基酸進行了測定,取得滿意的結果;苗虹等采用柱前衍生-高效液相色譜法測定食物中天冬氨酸、賴氨酸、亮氨酸等16種氨基酸含量。

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